磁珠法病毒总核酸(NA)提取试剂盒
分类：病毒总核酸(NA)提取目录：RD01
产品特性：
| 高通量：快速完成病毒总核酸提取过程 |
| 方便：无需高温洗脱，均可在室温下进行 |
| 生物安全：第一步操作即裂解细胞、变性蛋白 |
| 环境安全：不含苯酚、氯仿等有机试剂 |
| 稳定：保护易降解RNA |
| 自动化适用 |
本试剂盒适用于血清、血浆、咽拭子等液体样本以及固体及半固体样本中病毒总核酸的提取。试剂盒由高效吸附核酸的超顺磁性纳米微球和提取试剂体系组成：经过独特的表面修饰的磁珠，结合核酸能力更强、洗脱更容易；操作步骤简单，操作时间短，可在室温下完成整个提取过程，适合于快速核酸提取的磁珠自动化过程。
操作流程（示意图）：
磁珠法病毒总核酸（NA）在提取血液样本病毒核酸的应用实例见下。
| 目录号 | 规格 | 适用机型 |
|---|---|---|
| RD01001 | 20份 | 瓶装，适用于手工提取及Tecan、Hamilton等全自动移液工作站 |
| RD01002 | 100份 | 瓶装，适用于手工提取及Tecan、Hamilton等全自动移液工作站 |
| RD0196A | 96份 | Thermo Scientific KingFisher自动纯化系统 |
| RD0196B | 96份 | 医脉赛、圆点、奥盛、天隆、天根等品牌多种纯化机型 |
| RD0160C | 60份 | Thermo Scientific KingFisher mL磁珠提取仪 |
| RD0196D | 96份 | Thermo Scientific KingFisher Flex纯化系统 |
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【手动提取步骤】
1. 在离心管加入200µl样品溶液（血清、血浆、咽拭子等）、15µl核酸提取磁珠悬浮液、600µl裂解吸附液；
2. 置于旋转混和仪，温和混匀15min ；
3. 用磁分离架吸附磁珠，弃上清；
4. 加入600µl洗涤液I，振荡混合，洗涤磁珠1min，吸附磁珠，弃上清；
5. 加入600µl洗涤液II洗涤磁珠1min，吸附磁珠，弃上清；
6. 加入600µl洗涤液III洗涤磁珠1min，吸附磁珠，弃上清；
7. 再次加入600µl洗涤液III洗涤磁珠1min；
8. 吸附磁珠，弃上清后静置3-5min，去除乙醇残留；
9. 加入50µl洗脱液，温和混匀，洗脱5min；
10. 磁场吸附磁珠，回收含核酸洗脱液至另一RNase-free离心管内，用于后续检测或-20°C储存。
【自动化提取步骤（以32通道为例）】
1. RD0196B预装板设置（96孔深孔板，样品量200µl，16通量）
2. 从试剂盒中取出预分装96深孔板，轻甩96深孔板使试剂及磁珠均集中到96深孔板底部。使用前小心撕去铝箔封口膜，避免96深孔板振动，防止液体溅出（注意：室温低
于15°C时，请在开封使用前将96孔板置于37°C预热20min，以避免沉淀析出）；
3. 在第1列、第7列溶液中加入200µl待提取样本；
4. 放置2个8道磁套；选择附表所列的自动化提取程序，开始提取；客户可按所使用的核酸自动提取仪适当调整程序，如果有问题，请联系技术支持；
5. 转移第6列、第12列中含核酸的洗脱液至RNase-free离心管内，用于后续检测或-20°C储存。
| 次序 | 列号 | 程序 | 混合时间（sec.） | 磁吸时间（sec.） | 等待时间（sec.） | 体积（μl） | 混合速度 | 温度（℃） |
|---|---|---|---|---|---|---|---|---|
| 1 | 1 | 裂解 | 300 | 30 | 0 | 800 | 快 | 37 |
| 2 | 1 | 结合 | 600 | 30 | 0 | 800 | 中 | 37 |
| 3 | 2 | 洗涤1 | 120 | 30 | 0 | 600 | 快 | 室温 |
| 4 | 3 | 洗涤2 | 60 | 30 | 0 | 600 | 快 | 室温 |
| 5 | 4 | 洗涤3 | 60 | 30 | 0 | 600 | 快 | 室温 |
| 6 | 5 | 洗涤4 | 60 | 30 | 120 | 600 | 快 | 室温 |
| 7 | 6 | 洗脱 | 300 | 60 | 0 | 100 | 快 | 60 |
| 8 | 4 | 移磁珠 | 30 | 0 | 0 | 600 | 快 | 室温 |
1、提取病毒NA的时候，有哪些需要注意的地方，减少病毒NA的降解？
首先是针对样本来源的选取以及存储，其次在实验中尽量减少等待的时间，以及在实验结束后，可以选择低温（-80°C）保存。
2、固体及半固体样本怎么预处理？
预处理步骤如下：在样本中加入适量PBS缓冲液，涡旋振荡，5000g离心5min，吸取上清液进行总核酸提取。
