磁珠法滤纸片干血斑DNA提取试剂盒在干血斑DNA提取的应用实例见下。

我们提供了多种订购渠道和订购方式：
1.直接电话联系我们：400-880-7356；021-60556823
2.直接邮箱联系我们：order@emerther.cn
3.直接点击“在线预订”，即可跳转第三方页面，按照第三方页面流程点击“立即订购”即可（具体操作可参考以下视图）。

【手工提取步骤】

1. 溶解蛋白酶K：按标签所示，吸取PK溶解液至蛋白酶K干粉中配制成蛋白酶K溶液20mg/ml，颠倒混匀数次让蛋白酶K充分溶解；

2. 用打孔器打下3个直径为3mm的干血斑滤纸，或用剪刀剪下3个3mm*3mm大小的干血斑滤纸，放入离心管中；

3. 加入400µl血斑裂解液，20μl蛋白酶K溶液，混匀后，置于56°C振荡消化0.5-1h，至滤纸褪色干净；

4. 吸取消化后溶液至离心管中，加入15µl提取磁珠，轻微摇动混匀；

5. 加入600µl核酸吸附液，置于旋转混和仪，混匀30min；

6. 用磁分离架吸附磁珠，弃上清液；

7. 加入700µl洗涤液I洗涤磁珠，颠倒混匀洗涤1min，吸附磁珠，弃上清液；

8. 再次加入700µl洗涤液I洗涤磁珠1min，吸附磁珠，弃上清液；

9. 加入700µl洗涤液II洗涤磁珠1min，吸附磁珠，弃上清液；

10. 再次加入700µl洗涤液II洗涤磁珠1min；

11. 吸附磁珠，弃上清液后静置3min，去除乙醇残留；

12. 加入30µl洗脱液，置于56°C水浴锅，洗脱5min；

13. 磁场吸附磁珠，回收含基因组DNA的洗脱液至另一离心管，进行DNA检测及后续实验。

【自动化提取步骤（以32通道为例）】

1. DE1196B预装板设置（96孔深孔板，样品量200µl，16通量）

2. 用打孔器打下3个直径为3mm的干血斑滤纸，或用剪刀剪下3片3mm*3mm大小的干血斑滤纸，放入离心管中；

3. 加入400µl血斑裂解液和20μl蛋白酶K溶液置于50°C恒温振荡仪，高速振荡混匀0.5-1hr；

4. 从试剂盒中取出预分装96深孔板，轻甩96深孔板使试剂及磁珠均集中到96深孔板底部。使用前小心撕去铝箔封口膜，避免96深孔板振动，防止液体溅出（注意：室温低

于15°C时，请在开封使用前将96孔板置于37°C预热20min，以避免沉淀析出）；

5. 吸取血斑裂解后的溶液200μl至第1列、第7列溶液中；

6. 放置2个8道磁套；选择附表所列的自动化提取程序，开始提取；客户可按所使用的核酸自动提取仪适当调整程序；

7. 转移第6列、第12列中含核酸的洗脱液，用于后续检测或-20℃储存。

1. 基因组DNA得率低，蛋白残留高，有什么原因呢？

A.干血斑未充分裂解，应确保干血斑滤纸完全浸没于裂解液中，并且在裂解时快速振荡样品，使干血斑滤纸与裂解液充分接触。

B.磁珠加样量不足，请将磁珠悬液充分混匀后再吸取磁珠。

C.与磁珠结合不充分。在DNA与磁珠结合过程中请温和摇匀，确保DNA与磁珠充分结合。

D.样品没有按照要求保存导致基因组DNA降解。

2.获得的DNA条带弥散，DNA片段断裂，有什么原因呢？

A. 样品没有按照要求保存，请使用新鲜及正确保存的样品。

B. 操作过程过于剧烈，DNA被机械打断，请严格按照说明书操作。

3.DNA样品不纯，抑制或者干扰后续试验，有什么原因呢？

A. 磁珠没有完全干燥，有乙醇残留，最后一次洗涤后尽量吸净离心管内的液体。

B. 加入洗脱液之前将磁珠室温静置3-5min，确保乙醇完全挥发，也要避免过度干燥导致DNA不容易从磁珠上洗脱下来，减少提取量。