羧基化磁珠是包被有羧酸官能团的超顺磁性纳米微球，可以在被活化后（例如使用EDC和磺基-NHS活化），与核酸、蛋白质、抗体或其它分子上的伯胺进行偶联反应以形成稳定的酰胺键。偶联后的磁珠可通过磁场吸附从溶液中分离出来，直接用于下游的酶反应或大分子的免疫纯化分离等试验。
作用原理（示意图）：
略。
| 目录号 | 规格 | 适用机型 |
|---|---|---|
| FE03001 | 20mg/ml，1ml | 略 |
| FE03002 | 20mg/ml，5ml | 略 |
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以下实验步骤提供EmerTher羧基磁珠的一般操作流程。具体实验中磁珠的用量可以适当调整。 针对不同的用途，建议对偶合的条件（蛋白质浓度、偶联缓冲液、 pH和孵育
时间）进行相应的优化。EmerTher羧基磁珠的活化反应条件不只限于本文所述，其他常用活化条件也是适用的。
EDC/Sulfo-NHS活化和偶联步骤:
Step 1.活化
1. 使用前颠倒混匀磁珠；
2. 取50µl磁珠 (1 mg) 到微量离心管；
3. 将离心管放入磁力架，吸附磁珠并去上清；
4. 用1ml活化缓冲液洗涤磁珠，洗涤3次后，用1ml活化缓冲液重悬磁珠；
5. 同时加入5mg EDC和5mg sulfo-NHS，振荡混匀；
6. 室温下反应15min；
7. 磁场吸附，弃液体；
8. 加入1ml活化缓冲液洗涤磁珠，吸附磁珠并去上清；
9. 用5ml活化缓冲液重悬磁珠；
Step 2. 偶联
1. 偶联蛋白溶液配制：蛋白溶解在5ml偶联缓冲液中. 蛋白浓度一般1-10 mg/ml；
2. 在5ml磁珠悬液中加入5ml蛋白溶液，置于旋转混合仪室温下反应2-4hr，或4°C过夜；
3. 磁场分离磁珠，移除含蛋白上清液；
4. 加入10ml封闭液，重悬磁珠，置于旋转混合仪室温下混合2-4hr，或4°C过夜；
5. 通过磁场分离磁珠，去上清；
6. 用1ml封闭缓冲液洗涤偶联蛋白的磁珠两次，每次15min，吸附磁珠并去上清；
7. 用1ml封闭缓冲液或合适的缓冲液悬浮磁珠；
8. 偶联后的磁珠于2-8°C储存。
1、蛋白不溶于结合缓冲液？
答：蛋白可能为疏水性的，溶解蛋白之前可在结合缓冲液中加入适量DMSO（最多20%）。
2、结合效率低？
答：含有伯胺的缓冲液没有完全去除。请在蛋白结合之前对蛋白样品去盐或透析以完全去除伯胺（如Tris和glycine）。
