用于纯化回收100bp及以上的DNA片段,操作简捷快速、回收效率高,回收后的DNA产物不含引物、蛋白、单核苷酸、荧光染料或放射性同位素标记的单核苷酸,可直接应用于基因测序、连接、酶切、限制性分析、体外转录、Southern印迹杂交等各种分子生物学实验。
操作流程(示意图):
磁珠法PCR产物纯化试剂盒的应用实例见下。
1)医脉赛(EmerTher)磁珠法PCR产物纯化试剂盒纯化PCR产物
2)磁珠法PCR产物纯化试剂盒与某金标准品牌PCR产物纯化试剂盒对比
3)磁珠法PCR产物纯化试剂盒分别纯化50bp长度产物和1kp长度产物
目录号 | 规格 | 适用机型 |
---|---|---|
DF02001 | 1.8ml(适用50份样品) | 略 |
DF02001 | 18ml(适用500份样品) | 略 |
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【手工提取步骤】
1. 取 20µl PCR样品于2.0ml离心管中,加入36µl磁珠,温和吸打几次或温和摇动混合均匀3-5min;
[注意:操作过程中请勿颠倒混合!避免液体粘附于离心管管壁导致微量样品损失,降低回收率。]
2. 用磁分离架吸附磁珠20s,弃上清;
3. 加入100µl洗涤液(70%乙醇),温和吸打混合均匀1min;洗涤磁珠,吸附磁珠,弃上清;
4. 加入100µl洗涤液(70%乙醇),温和吸打混合均匀1min;
5. 吸附磁珠,弃上清;将残留液体弃去,再次弃上清;
6. 静置2-3min,尽量使乙醇挥发完全;
7. 加入20µl洗脱液进行洗脱,温和摇动混合均匀2-3min;
8. 磁场吸附磁珠,回收含PCR产物的洗脱液至另一干净离心管内,进行检测及后续实验。
1、PCR样品或其他DNA样本使用量能否改变?
答:需加入1.8倍体积的核酸提取磁珠,其它试剂也可等比例增加,实验步骤不变。
2、操作过程中能否剧烈混合?
答:磁珠高效特异吸附DNA片段,操作过程中请勿颠倒混合!避免液体粘附于离心管管壁导致微量样品损失,降低回收率。
3、乙醇残留太多是否会对后续检测有一定影响?
答:洗涤液洗涤后,尽量将残留液体去除后,让样品静置3-5min左右以挥发乙醇,将残留液体弃去然后加入洗脱液。如乙醇残留太多会对后续检测有一定影响;但样品如果
过于干燥,可能导致DNA不容易从磁珠上洗脱下来,减少提取量。