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磁珠法血液RNA提取试剂盒

分类:血液RNA提取目录:RE17

产品特性:

高通量:自动快速完成血液RNA提取
稳定:保护易降解RNA
环境安全:不含苯酚、氯仿等有机试剂
自动化适用

本试剂盒适用于提取血液样本中RNA。试剂盒由高效吸附核酸的超顺磁性纳米微球和安全环保的提取试剂体系组成:经过独特的表面修饰的磁珠,结合核酸能力更强、洗脱更容易;操作步骤简单,操作时间短,可在室温下完成整个提取过程,适合于快速核酸提取的磁珠自动化过程。

操作流程(示意图):


医脉赛(EmerTher)磁珠法血液RNA提取试剂盒提取血液样本RNA的应用实例见下。


目录号规格适用机型
RE1700120份瓶装,适用于手工提取及Tecan、Hamilton等全自动移液工作站
RE17002100份瓶装,适用于手工提取及Tecan、Hamilton等全自动移液工作站
RE1796B96份医脉赛、圆点、奥盛、天隆、天根等品牌多种纯化机型
RE1760C60份Thermo Scientific KingFisher mL磁珠提取仪
RE1796D96份Thermo Scientific KingFisher Flex纯化系统

我们提供了多种订购渠道和订购方式:
1.直接电话联系我们:400-880-7356;021-60556823
2.直接邮箱联系我们:order@emerther.cn
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【手工提取步骤】
1. 溶解蛋白酶K:按标签所示,吸取PK溶解液至蛋白酶K干粉中配制成蛋白酶K溶液20mg/ml,颠倒混匀数次让蛋白酶K充分溶解;
2. 取200μl血液样本,加入20μl蛋白酶K溶液、 600µl裂解吸附液,置于旋转混和仪,温和混匀5min;
3. 加入30µl磁珠,置于旋转混和仪,温和混匀5min,用磁分离架吸附磁珠,弃上清;
4. 加入600µl洗涤液I洗涤磁珠5min,吸附磁珠,弃上清;
5. 加入600µl洗涤液II洗涤磁珠2min,吸附磁珠,弃上清;
6. 加入600µl洗涤液III洗涤磁珠2min,吸附磁珠,弃上清;
7. 再次加入600µl洗涤液III洗涤磁珠2min,吸附磁珠,弃上清;
8. 吸附磁珠,弃上清;尽量吸除残留液体;
9. 静置3-5min,去除乙醇残留;
10. 加入60µl洗脱液,混合均匀,洗脱5min;
11. 吸附磁珠,回收含核酸洗脱液至另一RNase-free离心管内,用于后续检测或保存于-20°C冰箱。

【自动化提取步骤(以32通道为例)】
1. RE1796B预装板设置(96孔深孔板,样品量200µl,16通量)

2. 从试剂盒中取出预分装96深孔板,轻甩96深孔板使试剂及磁珠均集中到96深孔板底部。使用前小心撕去铝箔封口膜,避免96深孔板振动,防止液体溅出(注意:室温低于15°C时,请在开封使用前将96孔板置于37°C预热20min,以避免沉淀析出);
3. 在第1列、第7列溶液中加入200µl血液样本和20μl蛋白酶K溶液;
4. 放置2个8道磁套;选择附表所列的自动化提取程序,开始提取;客户可按所使用的核酸自动提取仪适当调整程序,如果有问题,请联系技术支持;
5. 转移第6列、第12列中含核酸的洗脱液至RNase-free离心管内,用于后续检测或-20°C储存。

次序列号程序混合时间(sec.)磁吸时间(sec.)等待时间(sec.)体积(μl)混合速度温度(℃)
11裂解3000080037
22吸磁30200600室温
31结合30030080037
42洗涤1300200600室温
53洗涤2120200600室温
64洗涤3120300600室温
75洗涤4120300600室温
86洗脱30060010050
94移去磁珠3000600室温


A.血液RNA得率低的可能原因有哪些?
1. 样品没有按照要求保存导致RNA降解。请使用新鲜的或正确保存的样本。
2. 取样前样品没有充分混匀。样品取样前适当将样品摇匀。

B.RNA提取后的注意事项包含什么?
1. RNA易降解,纯化后的产品请尽快使用;或保存于-20°C冰箱。
2. 长期保存请置于-70°C或加入RNase Inhibitor。