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磁珠法病毒总核酸(NA)提取试剂盒

分类:病毒总核酸(NA)提取目录:RD01

产品特性:

高通量:快速完成病毒总核酸提取过程
方便:无需高温洗脱,均可在室温下进行
生物安全:第一步操作即裂解细胞、变性蛋白
环境安全:不含苯酚、氯仿等有机试剂
稳定:保护易降解RNA
自动化适用

本试剂盒适用于血清、血浆、咽拭子等液体样本以及固体及半固体样本中病毒总核酸的提取。试剂盒由高效吸附核酸的超顺磁性纳米微球和提取试剂体系组成:经过独特的表面修饰的磁珠,结合核酸能力更强、洗脱更容易;操作步骤简单,操作时间短,可在室温下完成整个提取过程,适合于快速核酸提取的磁珠自动化过程。

操作流程(示意图):


医脉赛(EmerTher)磁珠法病毒总核酸(NA)在提取血液样本病毒核酸的应用实例见下。


目录号规格适用机型
RD0100120份瓶装,适用于手工提取及Tecan、Hamilton等全自动移液工作站
RD01002100份瓶装,适用于手工提取及Tecan、Hamilton等全自动移液工作站
RD0196A96份Thermo Scientific KingFisher自动纯化系统
RD0196B96份医脉赛、圆点、奥盛、天隆、天根等品牌多种纯化机型
RD0160C60份Thermo Scientific KingFisher mL磁珠提取仪
RD0196D96份Thermo Scientific KingFisher Flex纯化系统

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【手动提取步骤】
1. 在离心管加入200µl样品溶液(血清、血浆、咽拭子等)、15µl核酸提取磁珠悬浮液、600µl裂解吸附液;
2. 置于旋转混和仪,温和混匀15min ;
3. 用磁分离架吸附磁珠,弃上清;
4. 加入600µl洗涤液I,振荡混合,洗涤磁珠1min,吸附磁珠,弃上清;
5. 加入600µl洗涤液II洗涤磁珠1min,吸附磁珠,弃上清;
6. 加入600µl洗涤液III洗涤磁珠1min,吸附磁珠,弃上清;
7. 再次加入600µl洗涤液III洗涤磁珠1min;
8. 吸附磁珠,弃上清后静置3-5min,去除乙醇残留;
9. 加入50µl洗脱液,温和混匀,洗脱5min;
10. 磁场吸附磁珠,回收含核酸洗脱液至另一RNase-free离心管内,用于后续检测或-20°C储存。

【自动化提取步骤(以32通道为例)】
1. RD0196B预装板设置(96孔深孔板,样品量200µl,16通量)

2. 从试剂盒中取出预分装96深孔板,轻甩96深孔板使试剂及磁珠均集中到96深孔板底部。使用前小心撕去铝箔封口膜,避免96深孔板振动,防止液体溅出(注意:室温低于15°C时,请在开封使用前将96孔板置于37°C预热20min,以避免沉淀析出);
3. 在第1列、第7列溶液中加入200µl待提取样本;
4. 放置2个8道磁套;选择附表所列的自动化提取程序,开始提取;客户可按所使用的核酸自动提取仪适当调整程序,如果有问题,请联系技术支持;
5. 转移第6列、第12列中含核酸的洗脱液至RNase-free离心管内,用于后续检测或-20°C储存。

次序列号程序混合时间(sec.)磁吸时间(sec.)等待时间(sec.)体积(μl)混合速度温度(℃)
11裂解30030080037
21结合60030080037
32洗涤1120300600室温
43洗涤260300600室温
54洗涤360300600室温
65洗涤46030120600室温
76洗脱30060010060
84移磁珠3000600室温


1、提取病毒NA的时候,有哪些需要注意的地方,减少病毒NA的降解?
首先是针对样本来源的选取以及存储,其次在实验中尽量减少等待的时间,以及在实验结束后,可以选择低温(-80°C)保存。

2、固体及半固体样本怎么预处理?
预处理步骤如下:在样本中加入适量PBS缓冲液,涡旋振荡,5000g离心5min,吸取上清液进行总核酸提取。