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磁珠法植物样本DNA提取试剂盒

分类:植物样本DNA提取目录:DE04

产品特性:

方便
高通量
提取纯度高
环境安全
操作安全
自动化适用

本试剂盒是由高效吸附核酸的超顺磁性纳米微球和安全环保的提取试剂体系组成:经过独特的表面修饰的磁珠,结合核酸能力更强;只使用一种溶液同时裂解细胞并使DNA成分与磁珠结合;洗脱容易,使用TE缓冲液或水即可将基因组DNA从磁珠洗脱下来;操作步骤简单,操作时间短,无需液氮碾磨,有效去除植物多糖等杂质的干扰,适合于快速植物基因组DNA的磁珠自动化提取过程。使用本试剂盒纯化的基因组DNA可直接用于各种下游操作,包括酶切、PCR、文库构建、Southern杂交、基因测序等实验。

操作流程(示意图):


医脉赛(EmerTher)磁珠法植物样本DNA提取试剂盒在玉米和黄豆叶的DNA提取的应用实例见下。


目录号规格适用机型
DE0400120份瓶装,适用于手工操作及Tecan、Hamilton等全自动移液工作站
DE04002100份瓶装,适用于手工操作及Tecan、Hamilton等全自动移液工作站
DE0496B96份医脉赛、圆点、奥盛、天隆、天根等品牌多种纯化机型
DE0460C60份Thermo Scientific KingFisher mL磁珠提取仪
DE0496D96份Thermo Scientific KingFisher Flex纯化系统


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【手动提取步骤】
1.称取100mg植物样本放入研磨皿,加入1000μl植物研磨液,充分研磨破碎细胞,研磨至样本颗粒肉眼不可见为止;
2.将研磨好的植物组织转移至2ml离心管中,56oC孵育15min,500g离心5min,取200μl上清液混合600μlddH2O;
3.吸取200μ混合溶液于2ml离心管中,加入30μl核酸提取磁珠、400μl裂解吸附液,置于旋转混和仪,温和混匀20min;
4.用磁分离架吸附磁珠,弃上清;
5.加入800μl洗涤液I洗涤磁珠,颠倒混匀洗涤2min,吸附磁珠,弃上清;
6.再次加入800μl洗涤液I洗涤磁珠1min,吸附磁珠,弃上清;
7.加入800μl洗涤液II洗涤磁珠1min,吸附磁珠,弃上清;
8.再次加入800μl洗涤液II洗涤磁珠1min,将含磁珠的洗涤液移至另一干净离心管中;
9.吸附磁珠,弃上清后静置5min,去除乙醇残留;
10.加入150μl洗脱液,混合均匀洗脱5min;
11.磁场吸附磁珠,回收含基因组DNA的洗脱液至另一干净离心管内,进行DNA检测及后续实验。

【自动化提取步骤(以32通道为例)】
1.DE0496B预装板设置(96孔深孔板,样品量200µl,16通量)


2.从试剂盒中取出预分装96深孔板,轻甩96深孔板使试剂及磁珠均集中到96深孔板底部。使用前小心撕去铝箔封口膜,避免96深孔板振动,防止液体溅出(注意:室温低于15°C时,请在开封使用前将96孔板置于37°C预热20min,以避免沉淀析出);
3.在第1列、第7列含磁珠的溶液中加入200µl混合溶液(离心后的植物组织上清液+ddH2O得到的混合溶液);
4.放置2个8道磁套;选择附表所列的自动化提取程序,开始提取;客户可按所使用的核酸自动提取仪适当调整程序,如果有问题,请联系技术支持;
5.转移第6列、第12列中含核酸的洗脱液,用于后续检测或-20°C储存。

1、研磨珠是否会撞碎研磨管?
在研磨仪固定好以后,60Hz一般不会使研磨管破裂,如果发生意外,可以更换小体积的研磨珠进行研磨。
2、植物研磨液的作用是什么?
植物研磨液用于充分破裂细胞,辅助研磨珠研磨叶片。