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磁珠法组织DNA提取试剂盒

分类:组织DNA提取目录:DE05

产品特性:

高通量:快速完成组织DNA提取过程
操作便捷:无组织研磨过程
环境安全:不含有毒有机试剂
自动化适用

本试剂盒用于组织基因组DNA提取。试剂盒由高效吸附核酸的超顺磁性纳米微球和安全环保的提取试剂体系组成,其中DNA提取的操作过程都可在室温下进行,因此也非常适合于基因组DNA的磁珠自动化提取过程。
使用本试剂盒纯化的基因组DNA可适用于各种下游操作,包括酶切、PCR、文库构建、Southern杂交、基因测序等实验。

操作流程(示意图):


医脉赛(EmerTher)磁珠法组织DNA提取试剂盒在提取组织DNA的应用实例见下。


目录号规格适用机型
DE0500120份瓶装,适用于手工提取及Tecan、Hamilton等全自动移液工作站
DE05002100份瓶装,适用于手工提取及Tecan、Hamilton等全自动移液工作站
DE0596B96份医脉赛、圆点、奥盛、天隆、天根等品牌多种纯化机型
DE0560C60份Thermo Scentific KingFisher mL磁珠提取仪
DE0596D96份Thermo Scientific KingFisher Flex纯化系统


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【手工提取操作】
1.溶解蛋白酶K:按标签所示,吸取PK溶解液至蛋白酶K干粉中配制成蛋白酶K溶液20mg/ml,颠倒混匀数次让蛋白酶K充分溶解;
2.称取5-10mg组织碎片至离心管中,加入300µl组织消化液A、20µl蛋白酶K溶液,混合后置于56°C恒温水浴孵育45min,期间摇匀或用枪吸打(使组织充分分散,加速消化),直到消化完全;
3.吸取200µl消化好的液体样本至离心管中,加入600µl裂解吸附液和30µl核酸提取磁珠,置于旋转混和仪,充分混匀25min;
4.用磁分离架吸附磁珠,弃上清液;
5.加入700µl洗涤液I洗涤磁珠,将含磁珠的洗涤液转移至另一干净离心管中,颠倒混匀洗涤1min,吸附磁珠,弃上清液;
6.再次加入700µl洗涤液I洗涤磁珠1min,吸附磁珠,弃上清液;
7.加入700µl洗涤液II洗涤磁珠1min,吸附磁珠,弃上清液;
8.再次加入700µl洗涤液II洗涤磁珠1min,将含磁珠的洗涤液移至另一干净离心管中;
9.吸附磁珠,弃上清液后静置5min,去除乙醇残留;
10.加入100µl洗脱液,混和洗脱5min;
11.磁场吸附磁珠,回收含基因组DNA的洗脱液至另一离心管,进行DNA检测及后续实验。

【自动化提取步骤(以32通道为例)】
1.DE0596B预装板设置(96空深孔板,样品量:15000g离心后取全部下层液体,16通量)


2.从试剂盒中取出预分装96深孔板,轻甩96深孔板使试剂及磁珠均集中到96深孔板底部。使用前小心撕去铝箔封口膜,避免96深孔板振动,防止液体溅出(注意:室温低于15℃时,请在开封使用前将96孔板置于37℃预热20min,以避免沉淀析出);
3.在第1列、第7列中加入脱蜡消化后的全部样本(下层液体);
4.放置2个8道磁套;根据附表所列的自动化提取程序,开始提取;客户可按所使用的核酸自动提取仪适当调整程序,如果有问题,请联系技术支持;
5.转移第6列、第12列中含核酸的洗脱液,用于后续检测或-20℃储存。

步骤孔位名称混合时间(sec.)磁吸时间(sec.)等待时间(sec.)容积(μl)混合速度温度(℃)
11裂解6000090037
22吸磁30300750室温
31结合30030090037
42洗涤1120200700室温
53洗涤2120200700室温
64洗涤3120200700室温
75洗涤412030240700室温
86洗脱30060010050
94移去磁珠3000700室温


1. 室温低于15°C时,请在开封使用前将板A置于37°C预热20min,以避免沉淀析出。
2. 板中的裂解吸附液含蛋白变性剂,具有腐蚀性,若不慎溅到皮肤,请用大量水冲洗。