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磁珠法粪便DNA提取试剂盒

分类:粪便DNA提取目录:DE12

产品特性:

高通量:快速完成粪便DNA提取
环境安全:不含苯酚,氯仿等有机试剂
自动化适用

本试剂盒用于提取粪便样本DNA。试剂盒由高效吸附核酸的超顺磁性纳米微球和安全环保的提取试剂体系组成:经过独特的表面修饰的磁珠,结合核酸能力更强;只使用一种溶液裂解细胞并使DNA成分与磁珠结合;洗脱容易,使用TE缓冲液或水即可将基因组DNA从磁珠洗脱下来;操作步骤简单,操作时间短,整个操作过程都可在室温下进行,因此也非常适合于基因组DNA的磁珠自动化提取过程。

操作流程(示意图):


医脉赛(EmerTher)磁珠法粪便DNA提取试剂盒在粪便样本DNA提取应用的实例见下。
编号浓度(ng/μL)OD值(260/280)OD值(260/230)洗脱体积(μL)DNA总量(μg)
样本1506.231.7951.69710050.62
样本2489.691.8131.71910048.90
样本3504.911.8461.82310050.49
样本4497.741.8031.73610049.78

目录号规格适用机型
DE1200120份瓶装,适用于手工提取及Tecan、Hamilton等全自动移液工作站
DE12002100份瓶装,适用于手工提取及Tecan、Hamilton等全自动移液工作站
DE1296B96份医脉赛、圆点、奥盛、天隆、天根等品牌多种纯化机型
DE1260C60份Thermo Scientific KingFisher mL磁珠提取仪
DE1296D96份Thermo Scientific KingFisher Flex纯化系统


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【手工提取步骤】

1.取100-200mg的粪便样本于2ml含玻璃珠的研磨离心管中(若粪便样本为液态,取200μl于离心管中),使用四维旋转混匀仪漩涡混匀(40Hz,240s);(注意:如需提取病毒或脱落细胞核酸,可使用实验室漩涡振荡仪混匀后,进行步骤2操作。)
2.取出研磨离心管,6500g离心5min,取200-300μl上清液至2ml新离心管;
3.加入700μl核酸吸附液,置于旋转混和仪,温和混匀10min;
4.加入30μl提取磁珠,置于旋转混和仪,温和混匀5min;
5.用磁分离架吸附磁珠,弃上清;
6.加入700μl洗涤液I 洗涤磁珠,颠倒混匀洗涤1min,吸附磁珠,弃上清;
7.再次加入700μl洗涤液I 洗涤磁珠1min,吸附磁珠,弃上清;
8.加入700μl洗涤液II 洗涤磁珠1min,吸附磁珠,弃上清;
9.再次加入700μl洗涤液II 洗涤磁珠1min,将含磁珠的洗涤液移至另一干净离心管中;
10.吸附磁珠,弃上清后静置5min,去除乙醇残留;
11.加入100μl洗脱液,混和均匀,洗脱5min;
12.磁场吸附磁珠,回收含基因组DNA的洗脱液至另一干净离心管内,进行DNA检测及后续实验。

1. 获得的DNA条带弥散,DNA片段断裂,有什么原因呢?
A.样品没有按照要求保存,请使用新鲜及正确保存的样品。
B.操作过程过于剧烈,DNA被机械打断,请严格按照说明书操作。

2. DNA样品不纯,抑制或者干扰后续试验,有什么原因呢?
A.磁珠没有完全干燥,有乙醇残留,最后一次洗涤后尽量吸净离心管内的液体。
B.加入洗脱液之前将磁珠室温静置3-5min,确保乙醇完全挥发,也要避免过度干燥导致DNA不容易从磁珠上洗脱下来,减少提取量。