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磁珠法微生物DNA提取试剂盒

分类:微生物DNA提取目录:DE16

产品特性:

高通量
环境安全
自动化适用

本试剂盒用于提取样本中微生物基因组DNA。试剂盒由高效吸附核酸的超顺磁性纳米微球和安全环保的提取试剂体系组成:经过独特的表面修饰的磁珠,结合核酸能力更强;只使用一种溶液裂解细胞并使DNA成分与磁珠结合;洗脱容易,使用TE缓冲液或水即可将基因组DNA从磁珠洗脱下来;操作步骤简单,操作时间短,整个操作过程都可在室温下进行,因此也非常适合于基因组DNA的磁珠自动化提取过程。

操作流程(示意图):略。

略。

目录号规格适用机型
DE1600120份瓶装,适用于手工提取及Tecan、Hamilton等全自动移液工作站
DE16002100份瓶装,适用于手工提取及Tecan、Hamilton等全自动移液工作站
DE1696B96份医脉赛、圆点、奥盛、天隆、天根等品牌多种纯化机型
DE1696D96份Thermo Scientific KingFisher Flex纯化系统

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【手工提取步骤】
1. 溶解蛋白酶K:按标签所示,吸取PK溶解液至蛋白酶K干粉中配制成蛋白酶K溶液20mg/ml,颠倒混匀数次让蛋白酶K充分溶解;
2. 取300μl液体样本于2ml含玻璃珠的研磨离心管中(若样本为固体样本:取20-50mg的样本,加入灭菌水至300μl),使用四维旋转混匀仪漩涡混匀(40Hz,240s);(注意:如需提取复杂样本中病毒或细胞核酸,可使用实验室漩涡振荡仪混匀后,进行步骤3操作。)
3. 取出研磨离心管,6500g离心5min,取300μl上清液至2ml新离心管;
4. 加入700μl核酸吸附液,20μl蛋白酶K溶液,置于旋转混和仪,温和混匀10min;
5. 加入30μl提取磁珠,置于旋转混和仪,温和混匀10min;
6. 用磁分离架吸附磁珠,弃上清;
7. 加入900μl洗涤液I 洗涤磁珠,颠倒混匀洗涤5min,吸附磁珠,弃上清;
8. 再次加入900μl洗涤液I 洗涤磁珠2min,吸附磁珠,弃上清;
9. 加入900μl洗涤液II洗涤磁珠2min,吸附磁珠,弃上清;
10. 再次加入900μl洗涤液II洗涤磁珠2min,将含磁珠的洗涤液移至另一干净离心管中;
11. 吸附磁珠,弃上清后静置3min,去除乙醇残留;
12. 加入100μl洗脱液,混和均匀,洗脱5min;
13. 磁场吸附磁珠,回收含基因组DNA的洗脱液至另一干净离心管内,进行DNA检测及后续实验。



【全自动提取步骤(以32通道为例)】
1. DE1696B预装板设置(96孔深孔板,样品量300µl,16通量)

2. 取出预分装96深孔板,轻甩96深孔板使试剂及磁珠均集中到96深孔板底部。使用前小心撕去铝箔封口膜,避免96深孔板振动,防止液体溅出(注意:室温低于15°C时,请在开封使用前将96孔板置于37°C预热20min,以避免沉淀析出);
3. 第1、7列中加入处理好的样本溶液300μl和20μl蛋白酶K溶液;
4. 放置2个8道磁套;选择附表所列的自动化提取程序开始提取; 客户可按所使用的核酸自动提取仪适当调整程序,如果有问题,请联系技术支持;
5. 转移第6列、第12列中含核酸的洗脱液,用于后续检测或-20℃储存。

次序列号程序混合时间(sec.)磁吸时间(sec.)等待时间(sec.)体积(μl)混合速度温度(℃)
11裂解6000090037
22吸磁30200900室温
31结合90020090037
42洗涤1300200900室温
53洗涤2300200900室温
64洗涤3180200900室温
75洗涤418030180900室温
86洗脱42060010050
94移动磁场3000900室温


略。