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磁珠法DNA胶回收试剂盒

分类:胶回收目录:DF01

产品特性:

回收率高:回收率达60-95%
使用方便、快速,室温洗脱
磁珠分散性好,无需离心和乙醇沉淀过程
DNA片段范围广:50bp-20kb
自动化适用

胶回收试剂盒(DNA Gel Extraction Kit) 用于从琼脂糖凝胶电泳后割取的含有目的DNA的凝胶块中快速提取回收DNA。该目的DNA通常为PCR产物、质粒DNA酶切片断、质粒DNA单酶切后的线性化产物、DNA连接产物等。提取过程简单快速:使用溶胶液将琼脂糖凝胶完全融化后,加入磁珠使DNA与磁珠结合,并在室温下完成洗涤及将DNA从磁珠上洗脱下来,无需离心和乙醇沉淀过程,可实现DNA的快速大规模自动化纯化过程。试剂盒适用于纯化50bp-20kb DNA。 根据样品的不同,DNA回收效率通常为60-95%,纯化所得DNA可直接用于酶切,连接,转化,测序,PCR,杂交等后续操作。

操作流程(示意图):


医脉赛(EmerTher)磁珠法DNA胶回收试剂盒在胶回收的应用实例见下。


目录号规格适用机型
DF01001100份瓶装,适用于手工提取及Tecan、Hamilton等全自动移液工作站
DF01002500份瓶装,适用于手工提取及Tecan、H等全自动移液工作站


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【手工操作步骤】
1. 切胶回收后,称重,加入3倍重量体积比的溶胶液GS(胶为100mg,则加300µl溶胶液GS);
2. 70℃水浴加热15分钟至胶完全融化,期间颠倒混匀3-4次,加速凝胶融解。凝胶全部融解后从水浴中取出;待溶液冷却后,加入25µl磁珠混合均匀;
3. 按300µl溶胶液加入200µl沉淀液的比例加入沉淀液(溶胶液:沉淀液=3:2),颠倒混匀1-2min;
4. 用磁分离架吸附磁珠,弃上清;
5. 加入500µl洗涤液W1洗涤磁珠,吸附磁珠,弃上清;
6. 再次加入500µl洗涤液W1洗涤磁珠,吸附磁珠,弃上清;
7. 加入500µl洗涤液W2洗涤磁珠,吸附磁珠,弃上清后静置5min,去除乙醇残留;
8. 加入10-30µl洗脱液,于56℃洗脱5min;
9. 磁场吸附磁珠,回收含目的DNA的洗脱液至另一干净离心管内,进行DNA检测及后续实验。

1. 溶胶液GS对人体是否有刺激性?
答:有,请小心操作并注意适当防护。若不慎溅到皮肤,请用大量水冲洗。

2.溶胶液GS在低温下储存是否会有沉底析出?
答:会,如有沉淀,请在使用前先将该溶液置于37℃水浴中待溶液澄清后使用。

3.DNA片段大小是否会影响回收效率?
答:小于100bp或大于10kb的DNA片段回收效率略低一些。此外,若样品中DNA含量过低也会导致回收效率下降。

4.磁珠结合的DNA量有多少?
答:25μl核酸提取磁珠结合的DNA量可达10μg。